EURx (Klonierung) - Labormaterial

Universeller Kit zur genomischen DNA-Extraktion

• Verfahren basierend auf der Ethanolpräzipitation von Nukleinsäuren, die aus mit GeDI-Reagenz lysierten Zellen oder Geweben erhalten wurden
• GeDI-Reagenz ist eine einphasige Lösung ohne organisches Lösungsmittel
• Die gereinigte DNA kann für Routineanwendungen wie PCR, Klonierung, RFLP, Southern-Blotting usw. verwendet werden
• Inhalt: GeDI-Reagenz zur vollständigen DNA-Isolierung verschiedener Probentypen, ResSol-Resuspensionspuffer, Silica-Membran-Zentrifugensäulen
• Anwendbare Probenmengen: 50 mg tierisches Gewebe, 50 bis 200 mg Pflanzengewebe, 107 tierische Zellen, Bakterien oder Hefen
• variable Ausbeuten von der Art der Probe abhängig: 5 bis 50 µg bis 10 mg von tierischem Gewebe, 10 bis 100 mcg bis 500 mg Blatt, 4-7 µg bis 106 Säugetierzellen, von 30 bis 40 µg bis 109 Bakterienzellen
• Erhältlich in 25 Präparaten und 100 Präparaten
• Das GeDI-Reagenz ist auch als eigenständige Version erhältlich

RNA-Stabilisierungsreagenz RNA Fix

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• Stabilisierungs- und Schnellschutzreagenz für RNA aus frischen und ungefrorenen Proben (Gewebe, Leukozyten, bakterielle Zellkulturen)
• Hält RNAs bis zu 7 Tagen bei Raumtemperatur und bis zu 4 Wochen bei 4-8 °C, Lagerung für längere Zeiträume bei -20 °C oder -80 °C
• 10 Reagenz-Volumina pro Volumen Probe oder 10 µl pro mg Probe

RNA Extracol

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• Gesamt-RNA-Extraktionsreagenz aus verschiedenen Proben (tierische und menschliche Gewebe, Pflanzen, Zellen, Hefen und Bakterien)
• Phenolverbindung und Guanidiniumthiocyanat
• Einfaches Protokoll, RNA-Extraktion in einer Stunde
• Hohe Effizienz
• Einstellbar auf die Menge des Materials
• Erfordert die Zugabe von Chloroform, Isopropanol, Ethanol und Wasser-Klasse Molekularbiologie

Fragmentierung von Nukleinsäuren

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Der Großteil der von EURx Troduzierten Restriktionsenzyme arbeitet in ONE BUFFER-Puffer und kann für Doppelverdauungen verwendet werden.
Ein Puffer 10X Reaktionspuffer wird mit dem Enzym geliefert.

T4 DNA Ligase

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• Katalysiert die Bildung einer Phosphodiesterbindung zwischen den 5'-P- und 3'-OH-Enden von DNA-Nukleotiden oder doppelsträngiger RNA
• Katalyse der Ligation von 2 doppelsträngigen DNA-Fragmenten mit geraden Enden
• Katalyse der Ligation von DNA-Fragmenten mit komplementären kohäsiven Enden
• Versiegelt Einzelstrangbrüche in DNA-, RNA- oder DNA / RNA-Hybrid-Doppelsträngen
• Geeignet zur Klonierung von mit Restriktionsenzymen verdauten Fragmenten und zur Ligation von Linkern oder Adaptern an DNAs mit stumpfen Enden
• Erhältlich in 20000 und 100000 Einheiten*
• * Kohäsive Endeinheit - 200 UEC = 3 Weiss-Einheiten

Alkalische Phosphatase (CIP)

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• Katalyse der Hydrolyse von Phosphatmonoestern
• Verwendbar zum Entfernen des 5'-P-Endes von DNA oder RNA vor deren Markierung in 5 '
• Wird verwendet, um 5'-P-Enden von linearisierten Vektoren zu entfernen, um "leere" Rezirkularisierung während der Klonierungsprozesse zu verhindern
• Kompatibel mit der Dephosphorylierung von Proteinen
• Erhältlich in 1000 und 5000 Einheiten

Polynukleotid Kinase T4 (PNK)

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• Katalysiert die Phosphorylierung des 5'-OH-Endes von einzel- und doppelsträngigen DNA- oder RNA-Molekülen
• Katalysiert den Transfer von Phosphat-γ vom ATP-Molekül zum 5'-OH-Ende der Nukleinsäure
• Wird verwendet, um Linker, Adapter und Nukleinsäurefragmente vor der Ligation zu phosphorylieren
• Verwendbar zur 5'-Markierung von Nukleinsäuren vor der Sequenzierung
• Enthält eine 3'-Phosphatase-Sekundäraktivität
• Erhältlich in 1000 und 5000 Einheiten

PfuPlus! DNA-Polymerase

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• Mischung aus Pfu-DNA-Polymerase (Pyrococcus furiosus) und einem wärmestabilen Polymerisationsaktivator
• Hochreine, thermostabile und proofreading rekombinante Polymerase
• Formulierung zur Synthese von DNA-Sequenzen bis zu 20 kb
• Die Wiedergabetreue ist mehr als zehnmal höher als bei einem Standard-Taq
• Empfohlen für High-Fidelity-PCR, GC-reiche Sequenzen oder mit problematischen Sekundärstrukturen, ortsgerichteter Mutagenese und Klonierung mit stumpfen Enden
• Kann auch für die klassische PCR und Primerverlängerung bei hohen Temperaturen verwendet werden
Geliefert mit 10X Reaktionspuffer
• Erhältlich in 100, 500 und 2500 Einheiten
• OnPfuPlus! DNA-Polymerase: Hot Start Version, stabil bei Raumtemperatur, Aktivierung in 10 min bei 90 °C

Exo-BAP Mix

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• Mischung zur Reinigung von PCR-Produkten durch enzymatische Einwirkung vor der Sequenzierung oder SNP-Analyse
• Ermöglicht den Abbau von dNTPs und Primern, die während der PCR nicht verwendet wurden und noch im Reaktionsgemisch vorhanden sind
• Enthält wärmeempfindliche bakterielle alkalische Phosphatase (BAP) und Exonuklease I in speziell formuliertem Puffer
• Verfügbar in 100 Reaktionen und 500 Reaktionen

Wärmeempfindliche Bakterielle alkalische Phosphatase (BAP)

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• Sehr gut an die Immunodetektionstechniken bei der Diagnose und Immunomarkierung von Proteinen und Nukleinsäuren angepasst, die auf die Membran übertragen wurden
• Katalysiert die Freisetzung von 5'-P- und 3'-P-Gruppen von DNA, RNA und Nukleotidmolekülen
• Entfernt 5'-P aus DNA-, RNA-, rNTP- und dNTP-Molekülen
• Wird verwendet, um 5'-P-Enden von linearisierten Vektoren zu entfernen, um zu verhindern, dass ihre Rezirkularisierung während der Klonierungsprozesse "leer" wird
• Beständig gegen chemische Veränderungen und in einer Vielzahl von Reaktionspuffern aktiv
• Unaktivierbar durch 5-minütiges Erhitzen bei 70 °C
• Kompatibel mit der Dephosphorylierung von Proteinen
• Erhältlich in 1000 und 5000 Einheiten

Exonuklease I

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• Katalyse-Deletion von einzelsträngigen DNA-Nukleotiden in 3'-> 5'-Richtung
• Zersetzt keine doppelsträngige DNA oder RNA
• Ideal zum Abbau von einzelsträngigen Primern nach PCR vor DNA-Sequenzierung oder SNP-Analyse
• Wird für den einzelsträngigen DNA-Abbau in einer doppelsträngigen DNA-Präparation verwendet
• Aktiv in einer Vielzahl von Reaktionspuffern
• Erhältlich in 4000 und 20000 Einheiten

DNase I (RNase-free)

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• Endonuklease, die einzel- und doppelsträngige DNAs durch Freisetzung von 5'-phosphorylierten Di-, Tri- und Oligonukleotiden unspezifisch abbaut
• Wird verwendet, um kontaminierende DNA während der RNA-Präparation vor RT-PCR- und RT-qPCR-Anwendungen zu entfernen
• Wird auch verwendet, um Matrix-DNA nach in vitro-Transkription aus dem Reaktionsmedium zu entfernen
• Erhältlich in 1000 und 5000 Einheiten

RNase A (DNase-free)

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• Spezifische Pyrimidin-Endoribonuklease, die einzelsträngige RNA abbaut
• Katalysiert die Spaltung der Phosphodiesterbindung zwischen einem Pyrimidin und dem nächsten Nukleotid
• Wird zur Entfernung von RNA in DNA-Präparaten verwendet
• Erhältlich in den Formaten 10 und 50 mg

T7 Endonuklease I

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• Enzymabhängige Struktur, das nicht übereinstimmende DNA, heteroduplexe DNA, verzweigte DNA-Strukturen, Holliday-Übergänge und Einschnitte in DNA erkennt und spaltet
• Die Spaltung erfolgt an der ersten, zweiten oder dritten Phosphodiester-Verknüpfung 5 'der Fehlpaarung
• Hochreines rekombinantes Enzym

Mögliche Anwendungen:
• Erkennung von DNA-Fehlpaarungen, insbesondere im Zusammenhang mit der Genomeditierung nach der Crispr-Methode
• DNA-Junction-Auflösung mit 4 Verzweigungen
• Detektion oder Spaltung von Heteroduplex-DNA und Nicks in DNA
• Erhältlich in 250 und 1250 Einheiten